para -Dimethylaminobenzaldehyde es un compuesto orgánico que contiene amina y aldehído restos que se usan en el reactivo de Ehrlich y el reactivo de Kovac para la prueba de indoles . El grupo carbonilo reacciona típicamente con la posición 2 rica en electrones del indol, pero también puede reaccionar en las posiciones C-3 o N-1. [1] También se puede usar para la determinación de hidracina .
El reactivo de Ehrlich [ editar ]
Para -Dimethylaminobenzaldehyde es el ingrediente principal en el reactivo de Ehrlich . Actúa como un electrófilo fuerte que reacciona con el a -carbono rico en electrones (posición 2) de los anillos de indol para formar un aducto de color azul. [2] Se puede usar para detectar la presencia de alcaloides indol . No todos los alcaloides de indol dan un aducto coloreado como resultado de un impedimento estérico que no permite que la reacción continúe. [ cita requerida ]
El reactivo de Ehrlich también se usa como tinción en cromatografía de capa fina y como reactivo para detectar urobilinógeno en orinafresca y fresca . Si una muestra de orina se deja oxidar en el aire para formar urobilina, el reactivo no detectará el urobilinógeno. Al agregar algunas gotas de reactivo a 3 ml de orina en un tubo de ensayo, se puede ver un cambio de color, a rosa oscuro o rojo. El grado de cambio de color es proporcional a la cantidad de urobilinógeno en la muestra de orina.
Determinación de hidracina [ editar ]
El p -Dimethylaminobenzaldehyde reacciona con la hidracina para formar un colorante azoico que tiene un color amarillo distintivo. Por lo tanto, se utiliza para la determinación espectrofotométrica de hidracina en soluciones acuosas a 457 nm. [3]
Ensayo de Isaac Asimov [ editar ]
Isaac Asimov , en un ensayo humorístico de 1963 titulado "Tú también puedes hablar gaélico", [4] reimpreso en la antología Agregando una dimensión entre otras, rastrea la etimología de cada componente del nombre químico "para-di-metil-amino" -benz-alde-hyde "(por ejemplo, la sílaba" -benz- "deriva en última instancia del árabe lubān jāwī (لبان جاوي," incienso de Java "). Asimov señala que el nombre puede ser pronunciado al ritmo de la plantilla familiar " The Irish Washerwoman ", y relata una anécdota en la que una recepcionista de ascendencia irlandesa, al escucharlo cantar las sílabas, las confundió con el gaélico original.palabras a la plantilla. Este ensayo inspirado 1963 de Jack Carroll filk canción "Song potable de la Chemist," ( NESFA Hymnal Vol. 2 segunda ed. P. 65) fijado a la melodía de que jig, que comienza "Paradimethylaminobenzaldehyde, / citrato de sodio , cianuro de amonio , /. .. "
Una cromatografía líquida de ionización directa- interfaz de espectrometría de masas ( Direct-EI LC-MS interface ) es una técnica para el acoplamiento de cromatografía líquida y espectrometría de masas ( LC-MS ) basada en la introducción directa del efluente líquido en una ionización de electrones (EI) fuente. [1] Se generan espectros de masas de búsqueda en la biblioteca . EI en fase gaseosa tiene muchas aplicaciones para la detección de compuestos susceptibles de HPLC que muestran un mínimo de efectos adversos en la matriz. La interfaz directa EI LC-MS proporciona acceso a datos de ionización electrónica bien caracterizados para una variedad de aplicaciones de LC y espectros fácilmente interpretables de bibliotecas electrónicas para aplicaciones ambientales, de seguridad alimentaria , farmacéuticas , biomédicas y otras.
Fondo [ editar ]
La cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) y la espectrometría de masas de ionización electrónica (EIMS) son dos técnicas analíticas que, en principio, parecen ser incompatibles. Sin embargo, debido a que estos dos enfoques comparten una gran cantidad de aplicaciones en el análisis de moléculas adecuadas, por lo general menos de 1000 u, la comunidad científica ha dedicado un gran esfuerzo para desarrollar una interfaz confiable, fácil de usar e impecable. El primer dispositivo exitoso y disponible comercialmente para combinar EI y HPLC fue diseñado por Willoughby y Browner en 1984. [4] Se basó en la conversión del soluto en un haz de partículas, después de la formación de gotas de rociado y la eliminación del Vapores de solventes a través de un impulso de múltiples etapas.separador. Aunque su eficiente mecanismo de interfaz y un rasgo único, el rendimiento del haz de partículas a veces era inadecuado para un número creciente de aplicaciones nuevas y exigentes y fue reemplazado rápidamente por una familia de interfaces basadas en ionización a presión atmosférica (API) cuando estuvieron disponibles comercialmente. Sin embargo, la posibilidad de grabar un espectro de IE de una aplicación de HPLC siguió siendo un desafío durante mucho tiempo. El primer prototipo Direct-EI se presentó por primera vez en 2002 [5] y propuso un enfoque innovador que mejoró el rendimiento de la interfaz en comparación con el haz de partículas y abrió nuevas oportunidades para las aplicaciones de LC-MS.
Mecanismo [ editar ]
El mecanismo de interconexión está contenido dentro de una fuente de IE común, como la que se encuentra en cualquier sistema GC-MS. La fase líquida de una columna nano HPLC se admite desde el puerto de la columna capilar, donde primero se introducen y sellan el tubo de conexión y el nebulizador para evitar la pérdida de vacío. El mecanismo se basa en la formación de un aerosol.en condiciones de alto vacío, seguido de una rápida desolvatación de las gotitas y vaporización final del soluto antes de la ionización. La finalización del proceso es rápida y completa y reduce las posibilidades de descomposición térmica como se indica en la Figura, donde se muestra un esquema de la interfaz. El núcleo de la interfaz está representado por el micro-nebulizador. La punta del nebulizador sobresale en la fuente de iones, de modo que la expansión del rociado está completamente contenida dentro del volumen de iones. El eluato emerge como fase líquida a un caudal de 300-500 nL / min, y se evita cualquier evaporación prematura del disolvente en el tubo mediante un aislamiento térmico conveniente del nebulizador y la tubería de conexión del calor de la fuente circundante. La alta temperatura de la fuente de iones., entre 300 y 400 ° C, tiene una doble función: compensar el calor latente de la vaporización durante la desolvatación de las gotitas y convertir el soluto en la fase gaseosa. Si todos los componentes de esta interfaz simple están colocados y dimensionados correctamente, entonces cada sustancia separada por la nano-columna se convierte suavemente en la fase gaseosa, el perfil del pico se reproduce muy bien y se generan espectros de masas de alta calidad. Las principales ventajas de esta solución técnica son las siguientes: 1) Proporciona espectros de masas de alta calidad y totalmente adaptables a la biblioteca de la mayoría de las moléculas de sub-1 kDa susceptibles para HPLC, 2) Es una interfaz libre de ionización química (a menos que se opere intencionalmente) con precisión Reproducción del isótopo esperado.abundancia de iones, 3) La respuesta nunca está influenciada por los componentes de la matriz en la muestra o en la fase móvil , 4) Puede considerarse un detector universal para moléculas pequeñas porque la respuesta no está relacionada con la polaridad del compuesto.
Rendimiento y aplicaciones [ editar ]
La calidad espectral de masas [ editar ]
Una característica clave de esta interfaz es producir espectros EI de alta calidad a partir de compuestos disueltos en una fase líquida. En este caso, la calidad pretende ser una medida del grado de éxito en una comparación virtual con miles de espectros almacenados en las bibliotecas electrónicas. La capacidad de identificación en aplicaciones del mundo real, cuando los picos son pequeños y el ruido es alto, puede verse muy influenciada por la calidad de la ionización. Se usó una biblioteca NIST 2.0d para comparación. En este caso, la capacidad de identificación no se ve comprometida por la presencia de residuos de vapor de solvente y la calidad superior a la de un sistema GC-MS típico .
Respuesta frente a la composición de la matriz [ editar ]
En la ionización por electrospray (ESI), los componentes de matriz coeluidos pueden influir en la intensidad de la señal mediante una competencia por las cargas disponibles y por el acceso a la superficie de la gota para la emisión en fase gaseosa, creando así los llamados efectos de matriz. Los efectos de la matriz pueden ocurrir en diferentes etapas del proceso de interconexión, lo que conduce a una respuesta de la señal mejorada o suprimida impredeciblemente. La interfaz Direct-EI, utilizando una técnica de ionización en fase gaseosa, puede eliminar la mayoría de los efectos de matriz observados con ESI. De hecho, no está influenciado por la fase móvil ni por otros componentes de la matriz, de modo que la respuesta de la señal es siempre proporcional solo a la concentración de analito . Esto simplifica los procedimientos de preparación de muestras que pueden ser muy complejos y consumir mucho tiempo antes de ESI. [6]
Otros aspectos del rendimiento [ editar ]
La evaluación del rendimiento no puede considerarse completa sin tener en cuenta el límite de detección , el rango de respuesta lineal y la reproducibilidad de la señal . La IE es conocida como una técnica de ionización de baja eficiencia. Debido a que menos de 1/10 000 de las moléculas de muestra en fase gaseosa están ionizadas, no se pueden esperar impresionantes límites de detección. Sin embargo, el mecanismo de interfaz eficiente de esta interfaz permite el límite de detección de picogramos a nivel en el monitoreo de iones seleccionados (SIM) para la mayoría de las sustancias. Por otro lado, las técnicas de ionización suave como el ESI son, en algunos casos, mucho más eficientes pero generan menos iones de fragmentos. El costo de esta actitud se paga en términos de información estructural para que un segundo analizador genereLos espectros MS / MS son una obligación. Un espectro típico de EI, en general, tiene una amplia información estructural, y un espectrómetro de masas de una sola etapa más económico podría ser suficiente para la caracterización o identificación del analito. Como regla general, la sensibilidad a nivel de nanogramos se obtiene en modo de escaneo completo para la mayoría de las sustancias. Linealidad y reproducibilidad son dos puntos fuertes de la interfaz. Hasta cuatro órdenes de linealidad de magnitud con RSD inferior al 10% son valores comunes en muchas aplicaciones.
Aplicaciones [ editar ]
Direct-EI puede ofrecer una clara ventaja sobre ESI en varias aplicaciones, pero puede sobresalir en los siguientes casos:
- Gran número de compuestos de diferentes polaridades y propiedades químicas: [7] EI puede ofrecer una solución rápida y completa cuando se incluyen sustancias difíciles de detectar o y cuando se requiere una combinación de ciclos de detección de iones positivos y negativos para Cobertura completa de la detección de analitos.
- Caracterización de incógnitas: la comparación de bibliotecas ofrece una herramienta invaluable para la identificación de compuestos.
- Detección de compuestos no cromóforos que también dan una señal pobre o nula con API: para estos compuestos también están disponibles detectores de HPLC adicionales como el detector de dispersión de luz evaporativa (ELSD), el índice de refracción (RI) o el detector de aerosol de descarga de corona (CAD), pero cada uno de ellos Tiene limitaciones que limitan la obtención de una detección universal con sensibilidad razonable. EI-MS ofrecería una solución adecuada para este tipo de compuestos, en términos de sensibilidad y respuesta universal. De todos modos, GC es factible solo para compuestos con volatilidad alta a media y, por lo tanto, no se puede adoptar para una caracterización completa de mezclas de naturaleza compleja. La posibilidad de separar por separado la separación entre la IE y la HPLC representa una solución ideal.
- Análisis cuantitativos en presencia de efectos de matriz: EI-MS ofrece un rendimiento superior en comparación con ESI o APCI cuando las interferencias intrusas de matrices complejas pasan el procedimiento de limpieza y causan la supresión o mejora de la señal.
Base seca es una expresión del cálculo en química , ingeniería química y temas relacionados, en los que se ignora la presencia de agua para los fines del cálculo. El agua se descuida porque la adición y la eliminación de agua son pasos de procesamiento comunes, y también ocurren naturalmente a través de la evaporación y la condensación ; Con frecuencia es útil expresar composiciones en base seca para eliminar estos efectos.
Ejemplo [ editar ]
Una solución acuosa que contiene 2 g de glucosa y 2 g de fructosa por 100 g de solución contiene 2/100 = 2% de glucosa en base húmeda , pero 2/4 = 50% de glucosa en base seca. Si la solución hubiera contenido 2 g de glucosa y 3 g de fructosa, todavía habría contenido 2% de glucosa en base húmeda, pero solo 2/5 = 40% de glucosa en base seca.
Con frecuencia, las concentraciones se calculan en base seca utilizando el contenido de humedad (agua):
En el ejemplo anterior, la concentración de glucosa es del 2% tal como está y el contenido de humedad es del 96%.
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