Pigmentos fotosintéticos
Métodos de separación de pigmentos:
a) Separación de pigmentos vegetales por separación simple.
b) Separación de pigmentos vegetales por cromatografía sobre papel.
a. Separación de pigmentos vegetales por separación simple.
Elementos:
Mortero - Embudo cribado -Kitasato - Papel de filtro - Tubos de ensayo - Alcohol - Tetracloruro de carbono - Hojas de espinaca o Acelga - Bomba de vacío.
Objetivo:
Extraer los pigmentos fotosintéticos y separarlos mediante una técnica sencilla de fases.
Técnica:
- Lavar las hojas de espinacas o acelga, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el solvente extractante (acetona).
Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso. Fotografía 1.
3. Pasar el filtrado en dos tubos de ensayo (a y b) en partes iguales. El tubo a se lo dejará para trabajar con el espectroscopio en un lugar sombrío.
4. Al tubo b, se le agregará tetracloruro de carbono y luego se lo agitará por unos segundos. Se lo dejará reposar en una gradilla por 10 minutos.(Fotografía 7)
5. Los pigmentos se irán separando según su adsorción o afinidad con los solventes.(Fotografía 8)
Fotografía 7
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Fotografía 8
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Al observar el tubo de ensayo donde se encuentran los dos solventes, vemos dos zonas (figura B), que corresponden a los distintos pigmentos fotosintéticos presentes en las hojas de espinaca o acelga. Según su grado de solubilidad con el alcohol y el tetracloruro de carbono se reconocen estas zonas heterogéneas y no miscibles en este orden:
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Figura B
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